در رنگ آمیزی رایت – گیمسا گسترشی که با رنگ رایت-گیمسا به خوبی رنگ امیزی شده باشد در هنگام بررسی با چشم غیر مسلح به رنگ صورتی خواهد بود. در بزرگنمایی کم میکروسکوپ ، سلولها باید یکنواخت توزیع شده باشند.گلبولهای قرمز به رنگ صورتی هستند ، نه به رنگ لیمویی یا قرمز . رسوب رنگ در گسترش باید در کمترین حد باشد. رنگ گسترش می بایست یکنواخت باشد. سلولهای خون باید عاری از هرگونه ارتیفکت نظیر واکوئل باشند. هسته لکوسیتها به رنگ اغوانی و کروماتین و پاراکروماتین آن به وضوح از هم جدا می باشند و گرانولهای نوتروفیلیک سیتوپلاسمی ، رنگ قهوه ای مایل به زرد (برنزه) دارند. گرانولهای ائوزینوفیلیک ، قرمز مایل به نارنجی هستند و هر کدام از آنها به وضوح قابل تشخیص می باشند. سلول بازوفیل گرانولهای ارغوانی تیره دارد.پلاکتها گرانولهای بنفش تیره دارند و باکتری ها (در صورت وجود) آبی رنگ می باشند. سیتوپلاسم لنفوسیتها معمولا به رنگ آبی روشن و سیتوپلاسم منوسیتها دارای ته رنگ آبی- خاکستری است. انگل های مالاریایی سیتوپلاسمی به رنگ آبی آسمانی دارند و کروماتین آنها قرمز- ارغوانی می باشد.
محدودیت ها و عوامل مداخله گر :
آبی رنگ شدن بیش از اندازه :
در این صورت RBC ظاهر آبی یا سبز دارد. کروماتین هسته گلبولهای سفید یا NRBC آبی تیره تا سیاه رنگ است و گرانولهای نوتروفیل شدیداً رنگ اضافی میگیرند و بزرگ و برجسته به نظر می آیند و گرانولهای ائوزینوفیل آبی یا خاکستری میباشند.
علت :
الف- گسترش ضخیم
ب- افزایش مدت زمان رنگ آمیزی
ج- شستن ناکافی
د- قلیایی بودن زیاد رنگ یا محلول رقیق کننده
راه رفع این مشکل :
الف- کم کردن مدت رنگ با استفاده از رنگ کمتر و رقیق کننده بیشتر
ب- احتمال دارد آب بیش از حد قلیایی باشد بنابراین اگر با راه حل اول مشکل حل نشد باید بافر با PH کمتر تهیه شود.
صورتی شدن بیش از اندازه :
در این صورت RBC ها قرمز یا نارنجی رنگ شده و کروماتین هسته آبی کمرنگ می باشد . گرانولهای ائوزینوفیل قرمز درخشان است.
علت :
الف- رنگ آمیزی ناقص
ب- طولانی بودن مدت شستشو
ج- اسیدی بودن آب یا بافر
رسوب روی گسترش :
علت :
الف- لامهای کثیف
ب- خشک شدن اسمیر در طول دوره رنگ آمیزی
ج- شستشوی ناکافی در انتهای رنگ آمیزی
د- صاف نکردن کافی رنگ
ه- نشستن غبار روی لام یا گسترش
لینک های مفید:
Share It